माउस रैपिड एक्वासियस एड्यूवेंट

Q1: मेलानेंटिबॉडी सीरीज़ टीकाकरण adjuvants का चयन कैसे करें?

हमारे पानी में घुलनशील तरबूज श्रृंखला टीकाकरण सहायक विभिन्न जानवरों के लिए उपलब्ध हैं, जिनमें शामिल हैं: खरगोशों, चूहों, अल्पाका, बकरियों, मुर्गियों और सूअरों के लिए पानी-आधारित तेजी से टीकाकरण सहायक।

Q2: तरबूज श्रृंखला टीकाकरण सहायक की विशेषताएं क्या हैं?

मेलोनेंटिबॉडी टीकाकरण सहायक पारंपरिक फ्रायंड के सहायक की तुलना में कई फायदे प्रदान करता है, जो इस प्रकार है:

1. मेलोनेंटिबॉडी को केवल दो टीकाकरण शॉट्स की आवश्यकता होती है, चाहे मोनोक्लोनल या पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी तैयारी के लिए, फ्रायंड के सहायक की तुलना में टीकाकरण शॉट्स की संख्या को कम करना।
2. टीकाकरण शॉट्स की संख्या को कम करके और प्रति शॉट एंटीजन खुराक को कम करके, मेलोनेंटिबॉडी कुल एंटीजन खुराक को काफी बचाता है। अनुशंसित एंटीजन खुराक इस प्रकार हैं: (1) अधिकांश प्रोटीन एंटीजन के लिए, 25-50μg प्रति शॉट का सुझाव दिया गया है; (2) अत्यधिक इम्युनोजेनिक निष्क्रिय पूरे वायरस के लिए, पूरे बैक्टीरिया, और वायरस जैसे कण एंटीजन, प्रति शॉट 15-25μg की सिफारिश की जाती है; (3) वाहक प्रोटीन के साथ संयुग्मित छोटे अणु एंटीजन के लिए, 50-80μg प्रति शॉट की सलाह दी जाती है। वास्तविक खुराक मुख्य रूप से कंपनी के पिछले डेटा और अनुभव पर आधारित होनी चाहिए।
3. मेलोनेंटिबॉडी उच्च टाइटर्स और आत्मीयता के साथ तेजी से एंटीबॉडी उत्पादन की सुविधा प्रदान करता है। एक मानक टीकाकरण प्रोटोकॉल में, चाहे मोनोक्लोनल या पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी की तैयारी के लिए, तीन सप्ताह के भीतर केवल दो से तीन शॉट्स की आवश्यकता होती है, आमतौर पर एलिसा टाइटर्स (0.1000 के कटऑफ मूल्य के साथ) 1: 10000-1: 10000000 से पांचवें तक पांचवें तक प्राप्त करते हैं। सप्ताह।
4. मेलानेंटिबॉडी एंटीजन के प्राकृतिक विरूपण को संरक्षित करता है, जो कि मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की स्क्रीनिंग और अधिग्रहण की सुविधा प्रदान करता है, जो कि एंटीजन एपिटोप्स को लक्षित करता है, एक महत्वपूर्ण विशेषता है जिसमें फ्रायंड के सहायक की कमी होती है।
5. मेलानेंटिबॉडी पानी में घुलनशील है, जो फ्रायंड के सहायक द्वारा आवश्यक जटिल पायसीकरण प्रक्रिया की आवश्यकता को समाप्त करता है। एंटीजन और सहायक केवल पशु टीकाकरण के लिए सरल मिश्रण की आवश्यकता होती है।
6. मेलोनेंटिबॉडी इंट्रामस्क्युलर टीकाकरण मार्ग का उपयोग करता है, पारंपरिक माउस मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तैयारी की तुलना में प्रक्रिया को बहुत सरल बनाता है, जिसमें पंजे या स्प्लेनिक टीकाकरण शामिल हो सकता है।
7. तरबूज का एक महत्वपूर्ण अनुप्रयोग माउस पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी तैयार करने के लिए इसका सुविधाजनक उपयोग है। पारंपरिक पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी की तैयारी में अक्सर खरगोश शामिल होते हैं, जिसमें अधिक टीकाकरण शॉट्स, बड़े एंटीजन खुराक, धीमी एंटीबॉडी उत्पादन, और अक्सर उच्च तकनीकी आवश्यकताओं के कारण विशेष इकाइयों को आउटसोर्सिंग की आवश्यकता होती है। तरबूज टीकाकरण सहायक सहायक के साथ, कोई भी प्रयोगशाला पशु कर्मी आसानी से और तेजी से माउस पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी तैयार कर सकते हैं। एक मानक टीकाकरण प्रोटोकॉल को केवल पांच चूहों को टीकाकरण करने की आवश्यकता होती है, जिसके परिणामस्वरूप पांच सप्ताह के बाद उच्च गुणवत्ता वाले माउस पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी के 1 मिलीलीटर होते हैं। (इस सहायक का उपयोग करके माउस पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी तैयार करने के लिए दृढ़ता से सिफारिश की गई; उच्च गुणवत्ता वाले माउस पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का 1 एमएल उपयोगकर्ताओं के विशाल बहुमत की प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के लिए पर्याप्त है, जिसमें एलिसा, इम्युनोब्लॉटिंग, फ्लो साइटोमेट्री, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री, जैसे अनुप्रयोग शामिल हैं। )

Q4: सहायक के लिए उपयुक्त प्रजातियां

प्रजातियों की उपयुक्तता तरबूज को विभिन्न प्रजातियों के साथ टीकाकरण किया गया है, जिनमें चूहों, चूहों, खरगोशों, गिनी सूअर, बकरियों, अल्पाका, मुर्गियों, बंदरों, और बहुत कुछ शामिल हैं, जो सभी अच्छे परिणामों के साथ हैं। सहायक स्वयं कई सहायक का मिश्रण है, एक भी सहायक नहीं।

Q5: कम प्रतिजन एकाग्रता के लिए सहायक खुराक बढ़ाना

माउस टीकाकरण के लिए, यह आम तौर पर 50μl एंटीजन के साथ 50μl सहायक का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। खुराक को थोड़ा बढ़ाना संभव है, या दोनों पैरों को इंजेक्शन देना संभव है, कुल मिलाकर 100μl एंटीजन के साथ सहायक के 100μl। हालांकि, अत्यधिक उच्च एंटीजन खुराक, जैसे कि 100UG से अधिक सीधे चूहों में इंजेक्ट किया जाता है, उचित नहीं हैं क्योंकि वे मजबूत प्रतिक्रियाओं या यहां तक ​​कि घातक भी हो सकते हैं।

Q6: 1ml सहायक के साथ प्रतिरक्षित चूहों की संख्या

प्रत्येक टीकाकरण को आम तौर पर दो इंजेक्शनों के लिए 50μl सहायक की आवश्यकता होती है, इसलिए 1ml लगभग 8 चूहों को टीकाकरण कर सकता है। मानक प्रक्रिया में प्रति माउस दो इंजेक्शन शामिल हैं, जिनमें से प्रत्येक में 50μl सहायक और 50μl एंटीजन के साथ, कुल 100μl प्रति इंजेक्शन है। जबकि सैद्धांतिक रूप से 1ML 10 चूहों को प्रतिरक्षित कर सकता है, व्यावहारिक विचार जैसे क्षतिग्रस्त सिरिंज या ट्यूब आसंजन इसे लगभग 8 चूहों तक सीमित कर सकते हैं।

Q7: टीकाकरण और बूस्टर इंजेक्शन विधियाँ

टीकाकरण से पहले एडजुवेंट और एंटीजन को अच्छी तरह से मिलाया जाना चाहिए। टीकाकरण में देरी से अवसादन हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप सक्रिय घटकों का असमान वितरण होता है और संभावित रूप से टीकाकरण परिणामों को प्रभावित करता है। टीकाकरण के लिए, तरबूज के पानी के लिए अनुशंसित इंजेक्शन साइट चूहों के हिंद पैर की मांसपेशियों का आंतरिक पक्ष है। बूस्टर इंजेक्शन के लिए, एंटीजन को आमतौर पर 100-200μl की मात्रा में 20-50μg की खुराक पर पेट में इंजेक्ट किया जाता है, जो जिगर और मूत्राशय से बचता है।

Q8: क्या मांसपेशियों का टीकाकरण आवश्यक है?

जबकि मेलोनेंटिबॉडी एडजुवेंट मांसपेशियों के टीकाकरण के लिए अनुकूलित है और मुख्य रूप से इस तरह के उपयोग के लिए अभिप्रेत है, इसे उपचर्म में भी प्रशासित किया जा सकता है। हालांकि, इंट्रापेरिटोनियल टीकाकरण की सिफारिश नहीं की जाती है।

Q9: सहायक उपयोग के बाद गांठ गठन या रिसाव

यदि गांठ या रिसाव होता है, तो यह पिछले इंट्रापेरिटोनियल या चमड़े के नीचे के इंजेक्शन के कारण हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप मांसपेशियों के टीकाकरण के साथ अपरिचितता होती है। ग्राहक गांठ गठन को रोकने के लिए गहराई से इंजेक्शन लगाने की कोशिश कर सकते हैं। प्रारंभिक उपयोग में शराब के साथ हिंद पैरों को साफ करना, दो आंतरिक नसों से बचने और इंजेक्शन के बाद सुई को घुमाना चाहिए।

Q10: क्या टीकाकरण अंतराल को छोटा किया जा सकता है?

यह आम तौर पर एंटीबॉडी आत्मीयता और शक्ति पर संभावित प्रभावों के कारण टीकाकरण अंतराल को छोटा करने की सिफारिश नहीं की जाती है। हालांकि, सीरम पोटेंसी परीक्षण के लिए, दूसरे टीकाकरण के 7-10 दिन बाद परीक्षण करने के लिए यह संभव है, बशर्ते कि प्रभावकारिता मानकों को पूरा किया जाए। फ्यूजन के लिए बाद में बूस्टर इंजेक्शन तब तदनुसार प्रदर्शन किया जा सकता है।

Q11: क्या इसका उपयोग यूकेरियोटिक अभिव्यक्ति प्लास्मिड या पूरे वायरस के लिए किया जा सकता है?

मेलोनेंटिबॉडी एडजुवेंट प्लास्मिड टीकाकरण के लिए उपयुक्त नहीं है, लेकिन इसका उपयोग प्रोटीन और वायरस के लिए किया जा सकता है।

Q12: क्या इसका उपयोग गैर-प्रोटीन एंटीजन जैसे कोशिकाओं या वायरस के लिए किया जा सकता है?

तरबूज को हजारों एंटीजन टीकाकरण प्रयोगों में से दसियों में मान्य किया गया है, जो कोशिकाओं, वायरस, पेप्टाइड्स, पॉलीसेकेराइड्स, लिपिड, भारी धातुओं, एंटीबायोटिक्स, कीटनाशकों, ड्रग्स, खाद्य सुरक्षा-रिलेटिकों सहित गैर-प्रोटीन एंटीजन की एक विस्तृत श्रृंखला के साथ प्रभावशीलता दिखा रहा है। , वगैरह।

Q13: क्या इसका उपयोग न्यूक्लिक एसिड प्लास्मिड या आरएनए के टीकाकरण के लिए किया जा सकता है?

न्यूक्लिक एसिड टीकाकरण तरबूज सहायक के लिए उपयुक्त नहीं है, और इसके बजाय लिपिड नैनोकणों पर विचार किया जा सकता है।

Q14: क्या इसका उपयोग वैक्सीन विकास के लिए किया जा सकता है?

तरबूज को विकसित करने का प्राथमिक उद्देश्य मानव वैक्सीन सहायक के लिए था, और उनका उपयोग वैक्सीन विकास के लिए किया जा सकता है। हालांकि, पशु टीकों के लिए बाजार लागत आवश्यकताओं को देखते हुए, ग्राहक आमतौर पर उन्हें पालतू जानवरों या विशिष्ट जानवरों में उपयोग के लिए मानते हैं। फिर भी, अगर उच्च प्रदर्शन वाले पानी-आधारित सहायक का उपयोग करके लागत में कमी और दक्षता सुधार लक्ष्यों को प्राप्त करने के लिए सहयोग में रुचि है, तो आपूर्ति श्रृंखला लागत नियंत्रण में कंपनी की क्षमताएं और बड़े पैमाने पर जीएमपी उत्पादन लाइनें उन आवश्यकताओं को पूरा कर सकती हैं।

Q15: दो टीकाकरण के बाद उप -रूपी प्रभावकारिता

कमजोर इम्युनोजेनेसिटी के साथ एंटीजन के लिए या पहली बार उत्पाद का उपयोग करते समय, दो टीकाकरण के बाद प्रभावकारिता में सुधार नहीं हो सकता है। ऐसे मामलों में, एक तीसरे टीकाकरण को दूसरे एक के बाद 14 दिनों के बाद प्रशासित किया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप आमतौर पर प्रभावकारिता में उल्लेखनीय वृद्धि होती है। हालांकि, अधिकतम चार टीकाकरण की सिफारिश की जाती है। यदि प्रभावकारिता अभी भी चार टीकाकरण के बाद सुधार नहीं करती है, तो विशेष रूप से पेप्टाइड्स जैसे छोटे अणु एंटीजन के लिए फिर से प्रतिरक्षा या एंटीजन संशोधन पर विचार करना उचित है।

Q16: पर्याप्त एंटीबॉडी प्रभावकारिता के बावजूद स्प्लेनोमेगाली की अनुपस्थिति

यह सामान्य है। बीसीजी युक्त पारंपरिक सहायक मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को प्रेरित करते हैं, जिससे बीसीजी को लक्षित करने वाले कई बी कोशिकाओं की उपस्थिति के कारण बढ़े हुए स्प्लेन्स होते हैं।

Q17: सहायक, चयन मानदंड और मिश्रण की संभावना के बीच अंतर

खरगोश और माउस सहायक के बीच महत्वपूर्ण अंतर हैं, इसलिए उन्हें मिलाने की सिफारिश नहीं की जाती है। जबकि माउस सहायक को एक दूसरे के साथ मिलाया जा सकता है, यह आम तौर पर उचित नहीं है जब तक कि समय की कमी की आवश्यकता नहीं होती है।

Q18: फ्रायंड के सहायक की तुलना में पानी-आधारित सहायक अधिक महंगा क्यों है?

जबकि कीमत थोड़ी अधिक दिखाई दे सकती है, यह समय की लागत को बचाता है:

1. टीकाकरण और बाद की प्रक्रियाओं के लिए आवश्यक समय को कम करना, इस प्रकार एक महीने के लिए माउस देखभाल खर्चों पर बचत करना।
2. मूल राशि के केवल 1/5-1/10 के लिए आवश्यक एंटीजन खुराक को कम करना। प्राकृतिक एंटीजन की लागत काफी अधिक हो सकती है, जिसमें 1mg हजारों डॉलर के लिए बिक्री होती है।

Q20: क्या फ्रायंड के सहायक के साथ टीकाकरण के बाद तेजी से सहायक का उपयोग किया जा सकता है?

हां, अलग -अलग सहायक के समान कार्य होते हैं, इसलिए विभिन्न सहायक का उपयोग करने का प्रयास करना संभव है।

Q21: क्या इसका उपयोग एल्यूमीनियम सहायक के साथ समानांतर में किया जा सकता है?

हां, उनका उपयोग एक साथ किया जा सकता है। कोई भी टीकाकरण विधि सेलुलर और हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया दोनों उत्पन्न कर सकती है।

Q22: क्या तेजी से सहायक का उपयोग बूस्टर टीकाकरण के लिए किया जा सकता है जब इम्युनोजेन अनुपचारित प्रोटीन के बजाय कोशिकाएं होती हैं?

बूस्टर टीकाकरण का मुख्य उद्देश्य प्लीहा कोशिकाओं को एक उच्च डिग्री तक सक्रिय करना है, जो संलयन के बाद एंटीबॉडी का स्राव करने के लिए हाइब्रिडोमा कोशिकाओं की क्षमता को बहुत प्रभावित करता है। इसलिए, यह बूस्टर टीकाकरण के लिए सीधे इम्युनोजेन का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। इसके अतिरिक्त, कोशिकाओं से प्राप्त इम्युनोजेन में अक्सर कम प्रभावकारिता के मुद्दे और जटिल रचनाएं होती हैं। लक्ष्य एपिटोप प्रोटीन प्रमुख इम्युनोजेन नहीं हो सकता है। पिछले अनुभवों से पता चलता है कि एंटीबॉडी तैयारी सेवाओं के लिए समान सेल टीकाकरण दृष्टिकोण आम तौर पर प्रयोगात्मक अपेक्षाओं को पूरा करने में विफल रहे हैं।

Q23: एंटीबॉडी की तैयारी के उपयोग के दौरान, क्या सहायक को सहसंयोजक बंधन बनाने के लिए एंटीजन में पॉलीपेप्टाइड के साथ प्रतिक्रिया करने की आवश्यकता है?

टीकाकरण के लिए एंटीजन के साथ एंटीबॉडी को मिलाने की प्रक्रिया में, जलीय रैपिड एडजुएंट्स को आमतौर पर एक सहसंयोजक बंधन बनाने के लिए एंटीजन में पॉलीपेप्टाइड के साथ प्रतिक्रिया करने की आवश्यकता नहीं होती है। कार्रवाई का इसका तंत्र मुख्य रूप से है कि सहायक में बहुलक अणु का हाइड्रोफोबिक छोर गैर-सहसंयोजक बॉन्ड, जैसे हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन, हाइड्रोजन बॉन्ड्स, वैन डेर वॉल्स बलों के माध्यम से प्रोटीन एंटीजन (प्रोटीन-युग्मित पॉलीपेप्टाइड्स या छोटे अणुओं से युक्त) को बांधता है , आदि, एक जटिल बनाने के लिए। यह बाध्यकारी विधि प्रोटीन संरचना को अप्रभावित रख सकती है। जानवर में इंजेक्शन के बाद, सहायक धीरे -धीरे बाध्य एंटीजन को छोड़ सकता है, जिससे प्रतिरक्षा प्रणाली को धीरे -धीरे उत्तेजित करने के प्रभाव को प्राप्त होता है।

Q24: प्रजाति उपयुक्तता

मेलानेंटिबॉडी को विभिन्न प्रजातियों के साथ टीकाकरण किया गया है, जिनमें चूहों, चूहों, खरगोशों, गिनी सूअर, बकरियों, अल्पाका, मुर्गियों, बंदरों, और बहुत कुछ शामिल हैं, जो सभी अच्छे परिणामों के साथ हैं। सहायक स्वयं कई सहायक का मिश्रण है, एक भी सहायक नहीं।